發(fā)酵罐菌種實驗室種子制備

實驗室種子制備包括瓊脂斜面培養(yǎng)、固體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)和搖瓶液體培養(yǎng)等，目的是為種子罐提供種子。 保藏在砂土管或冷凍干燥管中的菌體在無菌條件下接入適合于孢子萌發(fā)或菌絲生長的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，成熟后可挑選正常的孢子再一次接入試管斜面。根據(jù)菌種的生理生長特性不同，提供給種子罐的菌種狀態(tài)也不同，分為： ①對于產(chǎn)孢子能力強或孢子發(fā)芽、生長繁殖快的菌種，可采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)孢子，孢子可直接作為種子罐的種子。如青霉素產(chǎn)生菌產(chǎn)黃青霉菌。
　?、趯τ诋a(chǎn)孢子能力不強或孢子發(fā)芽慢的菌種，可以用搖瓶液體培養(yǎng)法。將袍子接入液體培養(yǎng)基的搖瓶中，振蕩培養(yǎng)，獲得菌絲體作為種子。如產(chǎn)鏈霉素的灰色鏈霉菌。
　　③對于不產(chǎn)孢子的細菌，如生產(chǎn)谷氪酸的產(chǎn)生菌，谷氨酸棒桿菌一般采用斜面營養(yǎng)細胞保藏法，4 ℃冰箱保藏的斜面菌種用固體斜面活化培養(yǎng)后，即呵接入茄子瓶斜面或三角瓶液體培養(yǎng)，此培養(yǎng)物即可作為種子罐的種子。
　?、芙湍妇话惚２卦邴溠恐傊泵媾囵B(yǎng)基上，于4℃冰箱保藏，擴大培養(yǎng)可逐級擴大到10 ml液體試管、250 ml 三角瓶、1000 ml 三角瓶，即可作為100 L麥芽汁種子罐的種子。 固體斜面菌種培養(yǎng) 固體斜面試管培養(yǎng)在無菌室內(nèi)進行，菌種室需經(jīng)常清掃和消毒滅菌，以防止雜菌和噬菌體的污染。生產(chǎn)上使用的斜面菌種一般只移接三次，每次可移接數(shù)支，分別擴大培養(yǎng)后使用，不宜多次移種，避免菌種的自然變異引起的菌種不純。因此，菌種的分離純化工作是企業(yè)經(jīng)常性的工作。斜面培養(yǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件根據(jù)所用生產(chǎn)菌種的不同而異。 固體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng) 固體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)包括茄子瓶、克氏瓶、培養(yǎng)皿、蘑菇瓶、一三角瓶、瓷盤等培養(yǎng)方式。可以進行搖瓶培養(yǎng)或靜置培養(yǎng)。 搖瓶液體培養(yǎng) 三角瓶放到搖瓶機或搖床上，振蕩或回旋培養(yǎng)，搖瓶通氣最的大小取決于搖瓶機型式，轉(zhuǎn)數(shù)、振程（或偏心距）、三角瓶容量、裝料量。搖瓶培養(yǎng)是為了在振蕩過程中溶入較多的氧，以供微生物在生長繁殖過程中氧的消耗。實驗室階段的培養(yǎng)過程中，因為菌種和培養(yǎng)物的量較少，可以在無菌狀態(tài)下直接接入。 本文參考《發(fā)酵工程原理及技術(shù)》一書。 相關(guān)鏈接 2023年安徽黃山團建圓滿結(jié)束

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